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保持手术间的正压 手术中保持电动门处于关闭状态，尽量减少开关次数，严禁开门手术。根据不断讨论与反复斟酌，修订后《综合医院建筑设计规范》中，关于一般手术室的条文终确定为：“一般手术室应采用末端过滤器不低于高中效过滤器的空调系统或全新风通风系统。因为手术室的环境是一个密闭的洁净环境，门关闭时室内的气压大于室外的气压，从而保证手术室内的洁净空气只能向室外流动，室外的空气不会进入室内，开门后就破坏了压差系统，手术间的净化质量也将受到影响。
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（1）进入手术室必须更换洗手衣裤、鞋帽。各手术室空气净化系统在手术室墙面四角、净化机组、天花板、走廊、新风机、排风机都设有不同级别的过滤器，并对其进行定期清洁、维修和更换，严格保证室内空气的无菌。（2）严格控制入室人数。（3）尽量减少层流手术室的开门次数与时间（更不可将门打开不关），维持'相对密闭状态'，以防外来污染的进入。（4）手术前用酒精擦拭室内物品、程仪器、设备等。（5）术后及时、彻底清洁室内所有物品、墙壁及地面。（6）妇女不可用粉、头发喷雾剂和指甲油之类的化妆品，以减少污染来源。
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严格无菌操作技术。无菌手术和有菌手术应分室进行，特殊须进行特殊消毒灭菌处理。
室内保持严肃安静，禁止高声喧哗，手术期间不得聊天、看报等。
严格执行室内卫生清洁处理及隔离、消毒检测制度，落实安全防范措施。
手术室应常备各种急诊手术包及抢救器材，手术器械不得外借，如外借的需医教科批准
手术室器械应在清洁干净基础上消毒，各种药品器械材料应放在固定位置，贵重器械专人保管，每月清点、维修、保养。剧标志明显，专人加锁保管，普通药品每天清点并记录，每月检查一次，专人负责。
负责保管和送检手术中采集的标本，请医生及时填写病理标本、送检单并作好送检登记，督促及时送检。
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洁净手术室的维护原则
新风机组:每日检查一次，保持内部干净、初效滤网排2周清洗一次。还对室内的清洁工作有特殊的要求，室内墙角全部为弧形结构设计，找不到任何一个90°的墙角，使细菌无处藏身，避免了清除不尽的死角，并且室内无须使用物理或化学方法进行消毒，这样既节省劳动又防止外来污染的进入。初效过滤器每3-6个月更换;中效过滤器征周检查一次，6一12个月更换;亚高1效过滤器半年以上更换一次:高1效过滤器1年检查一次，当阻力超过设计阻力160Pa或已经使用3年以上时应予以更换。